Дар гирду атрофи мо кахрамонони но-ном бисьёранд, ки гуё оддй бошанд хам, вале дар хакикат хомушона барои мо сахми калон мегузоранд.Протеиназа К "қаҳрамони номаълум" дар соҳаи ташхиси молекулавӣ аст, гарчанде ки дар муқоиса бо "калон ва тавоно" дар ин соҳа, протеиназа К он қадар паст аст, ки мо кайҳо аҳамияти онро сарфи назар кардаем.Бо сар задани эпидемияи нави тоҷи, талабот ба протеиназа К зиёд шуд ва таъминот дар дохил ва хориҷ аз истеъмол хеле ақиб мондааст ва ҳама ногаҳон фаҳмиданд, ки протеиназа К хеле муҳим аст.
Протеиназа К чӣ кор мекунад?
Протеиназа К протеазаи серин буда, фаъолнокии ферментҳои протеолитикӣ дорад ва метавонад фаъолиятро дар доираи васеи муҳитҳо (рН (4-12,5), буфери намакҳои баланд, ҳарорати баланди 70°С ва ғ.) нигоҳ дорад.Илова бар ин, фаъолияти протеиназа К аз ҷониби SDS, мочевина, EDTA, гидрохлориди гуанидин, изотиоцианати гуанидин ва ғайра монеъ намешавад ва миқдори муайяни маводи шустушӯй низ метавонад фаъолияти протеиназаи К.-ро дар табобати тиббӣ (безараргардонии вирус ва микробҳо) афзоиш диҳад. ), озуқаворӣ (нарм кардани гӯшт), чарм (нарм кардани мӯй), виносозӣ (тозакунии спирт), тайёр кардани кислотаи аминокислотаҳо (парҳои таназзулшуда), истихроҷи кислотаи нуклеинӣ, гибридизатсия дар ҷои ва ғ., протеиназа К татбиқҳо мавҷуданд.Истифодаи маъмултарин истихроҷи кислотаи нуклеинӣ мебошад.
Протеиназа К метавонад ҳама намуди сафедаҳо дар намуна, аз ҷумла он гистонҳоеро, ки бо кислотаҳои нуклеинӣ зич пайвастанд, ферментатсия кунад, то ки кислотаҳои нуклеинӣ аз намуна озод карда шаванд ва ба иқтибос бароварда шаванд, ки ба марҳилаи навбатии истихроҷ ва тозакунӣ мусоидат мекунад.Ҳангоми муайян кардани кислотаи нуклеини вирусӣ, протеиназа К яке аз ҷузъҳои муҳими маҳлули интихоби вирус мебошад.Протеиназа К метавонад сафедаи куртаи вирусро шикаста ва ғайрифаъол кунад, ки дар марҳилаи интиқол ва ошкор бехатартар аст;Илова бар ин, протеиназа К инчунин метавонад RNase-ро таназзул кунад, таназзули РНК-и вирусиро пешгирӣ мекунад ва муайян кардани кислотаи нуклеинро осон мекунад.
Шӯҳрати шабонарӯзии протеиназа К
Новобаста аз он ки дар соҳаи тадқиқоти илмӣ ё дар соҳаи IVD, истихроҷи кислотаи нуклеинӣ таҷрибаи асосӣ аст, бинобар ин протеиназа К ҳамеша мавҷудияти хеле муҳим буд.Аммо, дар гузашта протеиназа К нисбат ба нақши он хеле камтар маълум буд.Қисми зиёди ин аз он сабаб буд, ки муносибати талабот ва пешниҳоди протеиназа К хеле устувор буд.Теъдоди ками одамон фикр мекунанд, ки таъминоти протеиназа K мушкилот хоҳад буд.
Бо сар задани эпидемияи нави тоҷ, талабот ба озмоиши кислотаи нуклеинӣ афзоиш ёфт.То охири моҳи июни соли 2020, Чин тақрибан 90 миллион озмоиши нави тоҷро анҷом дод ва ин рақам дар миқёси ҷаҳонӣ боз ҳам нигаронкунандатар аст.Дар таҷрибаҳои истихроҷи кислотаи нуклеинӣ консентратсияи кории протеиназа К тақрибан 50-200 мкг/мл аст.Умуман, барои истихроҷи намунаи кислотаи нуклеинӣ тақрибан 100 мкг протеиназа К лозим аст.Ҳангоми истифодаи воқеӣ, бо мақсади баланд бардоштани самаранокии истихроҷи кислотаи нуклеин, аксар вақт Proteinase K ба миқдори зиёд истифода мешавад.Муайян кардани кислотаи нуклеинӣ аз коронавируси нав миқдори зиёди протеиназа К-ро ба вуҷуд овард.Тавозуни аслии талабот ва пешниҳоди протеиназа К зуд вайрон шуд ва протеиназа К дар як шабонарӯз маводи муҳими пешгирии эпидемия гардид.
Мушкилот дар истеҳсоли протеиназа К
Ҳарчанд бо рушди эпидемия арзиши муҳими протеиназа К аз ҷониби одамон баҳо дода шудааст, аммо хиҷолатовар аст, ки ба далели аз ҳад зиёд кам будани протеиназа К, шумораи ками ширкатҳои ватанӣ дар истеҳсоли протеиназа К. Вақте ки одамон мехоҳанд истеҳсоли протеиназа К-ро таъсис диҳанд Дар ҷараёни истеҳсолот маълум шуд, ки протеиназа К сафедаи бениҳоят махсус аст.Дар муддати кутох васеъ кардани иктидори истехсолии протеиназа К хеле душвор аст.
Истехсоли калони протеиназа К ба душворихои зерин дучор меояд
1. Ифодаи паст
Протеиназа К метавонад ба таври мушаххас аксари сафедаҳоро таназзул кунад ва боиси заҳролудшавии ҷиддии ҳуҷайраи мизбон гардад.Аз ин рӯ, сатҳи ифодаи протеиназа К умуман хеле паст аст.Скрининги системаҳои экспрессиявӣ ва штаммҳое, ки протеиназаи К-ро баланд ифода мекунанд, одатан давраи тӯлониро талаб мекунад.
2. Боқимондаҳои пигментҳо ва кислотаҳои нуклеинӣ
Ферментатсияи миқёси калон миқдори зиёди пигментҳо ва пасмондаҳои кислотаи нуклеинро ба вуҷуд меорад.Тоза кардани ин ифлосиҳо бо як раванди оддии тозакунӣ душвор аст ва поксозии мураккаб хароҷотро зиёд ва суръати барқароркуниро коҳиш медиҳад.
3. Ноустуворӣ
Протеиназа К ба қадри кофӣ устувор нест, вай метавонад худро ферментатсия кунад ва онро дар ҳарорати 37°С муддати дароз бе агенти муҳофизатӣ устувор нигоҳ доштан душвор аст.
4. Бориши осон
Ҳангоми тайёр кардани хокаи дар яхдон хушкшудаи протеиназа К, барои он ки миқдори сахти протеиназа К дар хокаи яхкардашуда калон бошад, бояд дар консентратсияи баланд агенти муҳофизаткунандаи яхкардашуда илова карда шавад, аммо вақте ки консентратсияи протеиназа К ба 20 мг/мл ва аз он зиёдтар мерасад, осон аст Агрегатсия преципитате ба вуҷуд меояд, ки дар яхкунӣ-хушккунии протеиназа К бо миқдори зиёди сахт душвориҳои зиёд меорад.
5. Сармоягузории калон
Протеиназа К дорои фаъолияти пурқуввати протеазӣ мебошад ва метавонад дар лаборатория дигар протеазҳоро гидролиз кунад.Аз ин рӯ, протеиназа К барои тадқиқот, коркард ва истеҳсолот соҳаҳои махсуси истеҳсолӣ, таҷҳизот ва кормандонро талаб мекунад.
Маҳлули протеиназа K XD BIOCHEM
XD BIOCHEM дорои платформаи ифода ва тозакунии сафедаҳои баркамол буда, дар ифода ва тозакунии сафедаҳои рекомбинантӣ ва оптимизатсияи равандҳои истеҳсолӣ таҷрибаи бой дорад.Тавассути зуд ташкил намудани коллективи тадкикоти илмй ва конструкторй процесси калони истехсоли протеиназа К.Истехсоли хармохаи хока дар яхдон зиёда аз 30 килограммро ташкил медихад.Маҳсулот дорои кори мӯътадил, фаъолияти баланди ферментҳо ва боқимондаҳои цитохром ва кислотаи нуклеинӣ нест.Хуш омадед ба тамос бо XD BIOCHEM Бастаи озмоиширо гиред (почтаи электронӣ:sales@xdbiochem.comТел: +86 513 81163739).
Қарорҳои техникии XD BIOCHEM дар бар мегиранд
Бо истифода аз интегратсияи плазми бисёр нусхабардорӣ, штаммҳои экспрессии баланд бо сатҳи ифодаи 8 г/л интихоб карда мешаванд, ки мушкилоти пасти экспрессияи протеиназа К-ро бартараф мекунад.
Тавассути ташкили раванди тозакунии бисёрқадам, пасмондаҳои цитохром ва кислотаи нуклеини протеиназа К аз арзиши стандартӣ бомуваффақият хориҷ карда шуданд.
Тавассути скрининги баландсуръати формулаҳои буферии муҳофизатӣ, буфере интихоб карда шуд, ки метавонад протеиназа К-ро дар 37°С устувор нигоҳ дорад.
Буферҳои скринингӣ мушкилотеро бартараф мекунанд, ки протеиназа К дар консентратсияи баланд ҷамъ кардан ва боришот кардан осон аст ва барои хушкшавии таркиби сахти протеиназа К замина мегузорад.
Намунаи XD BIOCHEM протеиназа K
Санҷиши устувории XD BIOCHEM протеиназа K: пас аз 80 д дар ҳарорати хонагӣ тағироти назаррас дар фаъолият ба назар намерасад
Санҷиши устувории XD BIOCHEM протеиназа K: пас аз 80 д дар ҳарорати хонагӣ тағироти назаррас дар фаъолият ба назар намерасад.
Муқоисаи таъсири истихроҷи кислотаи нуклеини XD BIOCHEM протеиназа K ва маҳсулоти рақобаткунанда.Дар раванди истихроҷи кислотаи нуклеин мутаносибан XD BIOCHEM ва протеиназаи рақобатпазир истифода мешаванд.Самаранокии истихроҷи XD BIOCHEM протеиназа K баландтар ва арзиши Ct гени мақсаднок камтар аст.
Вақти фиристодан: 31 декабри 2021