4-нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS: 200422-18-0

Таъсири: ONPG як субстрат аст, ки махсус барои муайян кардани мавҷудият ва фаъолияти фермент β-галактозидаза истифода мешавад.Вақте ки фермент β-галактозидаза мавҷуд ва фаъол аст, он ONPG-ро ба ду маҳсулот тақсим мекунад: о-нитрофенол ва ҳосилаи галактоза.Озодшавии о-нитрофенол боиси тағирёбии ранги зард мегардад, ки онро бо ёрии спектрофотометр чен кардан мумкин аст.

Ариза: ONPG дар таҳқиқоти биологияи молекулавӣ ва биохимия якчанд барномаҳо дорад:

Муайян кардани фаъолияти β-галактозидаза: ONPG одатан барои чен кардан ва муайян кардани фаъолияти ферментҳои β-галактозидаза истифода мешавад.Суръати хосилшавии о-нитрофенолро, ки ба фаъолияти фермент мутаносиб аст, ба таври спектрофотометрй чен кардан мумкин аст.

Ифодаи ген ва танзим: ONPG аксар вақт дар таҷрибаҳои марбут ба таҳқиқоти ифода ва танзими ген истифода мешавад.Он аксар вақт дар таҳлили протеини синтез истифода мешавад, ба монанди системаи синтези lacZ, барои омӯзиши ифодаи генҳо таҳти назорати промоутерҳои мушаххас.Фаъолияти бета-галактозидазае, ки бо истифода аз ONPG чен карда мешавад, дар бораи сатҳи ифодаи генҳо маълумот медиҳад.

Скрининг барои фаъолияти β-галактозидаза: ONPG метавонад ҳамчун усули скрининги колориметрӣ дар технологияи рекомбинатии ДНК барои муайян кардани мавҷудият ва фаъолияти гени LacZ, ки β-галактозидазаро рамзгузорӣ мекунад, истифода шавад.Ин усули скрининг барои муайян кардани клонҳое, ки гени таваҷҷӯҳ доранд, кӯмак мекунад.

Омӯзиши кинетикаи ферментҳо: ONPG инчунин дар омӯзиши кинетикаи ферментҳои β-галактозидаза муфид аст.Бо чен кардани суръати реаксияи фермент-субстрат дар консентратсияи гуногуни субстрат, метавон параметрҳои кинетикиро, ба монанди константаҳои Михаэлис-Ментен (Км) ва суръати максималии реаксия (Vmax) муайян кардан мумкин аст.